| Anotācija |
Šī pētījuma galvenais mērķis bija radīt mutantus no rauga Phaffia rhodozyma ar augstāku proteīna daudzumu salīdzinājumā ar savvaļas tipa celmu, izmantojot aminoskābju inhibitoru glufosinate-ammonium kā selektīvo vielu mutantu atlasei.
Pateicoties augstajam proteīna saturam un straujai augšanai, vienšūnu proteīni, kas iegūti no mikroorganismiem, nodrošina ilgtspējīgu alternatīvu tradicionālajiem proteīna avotiem,. Vienšūnas proteīnus var izmantot kā pārtikas aizstājēju cilvēku un dzīvnieku barībā. Pimērots mikroorganisms ir viens no proteīnu ražošanas kritērijiem, kuru var viegli ģenētiski modificēt, lai panāktu vēlamā parametra uzlabošanos. Raugs Phaffia rhodozyma ir pazīstams ar savu augsto spēju ražot astaksantīnu, un to galvenokārt izmanto tieši šim nolūkam. Šis raugs satur arī lielu daudzumu proteīna, vitamīnu un nepiesātināto tauku, kaut gan par to ir maz pētījumu. Bija svarīgi atrast rauga barotni ar neorganisko slāpekli, lai pārbaudītu, kā raugs uz tās augs. Pētījumā tika izmantots savvaļas rauga celms un trīs baltie mutanti. Laboratorijas darbi ietver barotnes sagatavošanu, pH regulēšanu un kolbu eksperimentus biomasas iegūšanai. Paraugi ar lielāko biomasas daudzumu tika atlasīti turpmākai analīzei uz proteīna daudzumu. Eksperimentos iegūtās biomasas proteīna saturs tika detalizēti analizēts, izmantojot BCA (Protein Assay Reagent) analīzi. Tika atlasīts paraugs ar augstāko proteīna saturu un pakļauts nejaušai EMS (Ethyl methanesulfonate) mutaģenēzei, lai uzlabotu proteīnu biosintēzes spēju. Lai atlasītu iespējamos proteīnu ražojošos mutantus, tika izmantots aminoskābju inhibitors glufosinate-ammonium. Pēc potenciālo mutantu atlases tika veikts atkārtots biomasas kolbas eksperiments, lai atkārtoti analizētu proteīna saturu. Šis pētījums parādīja, ka raugs Phaffia rhodozyma var augt uz barotnes, kas satur neorganiskā slāpekļa avotu. Pētījums arī parādīja labu potenciālu proteīna satura ziņā. Pētījumā viens no baltajiem mutantiem parādīja labāku rezultātu nekā citi baltie mutanti un savvaļas rauga celms. Rezultāti parāda potenciālu turpmākiem pētījumiem, lai izstrādātu rentablas un videi draudzīgas akvakultūras barības alternatīvas.
Darbs izstrādāts Latvijas Zinātnes padomes finansētā fundamentālo un lietišķo pētījumu projektā “Herbicīdi kā pārtikas proteīniem bagāto mutantu atlases instruments”, projekts Nr.lzp-2022/1-0126. |
